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Diálise

 



A diálise é um processo onde moléculas são separadas através de uma membrana semipermeável seletiva ao tamanho das partículas (peso molecular). Os tubos de diálise são semipermeáveis, fabricados em celulose regenerada ou éster de celulose, e tendo uma consistência gelatinosa. Como a membrana seletivamente permite a passagem de solutos menores, mantendo espécies de maior porte, a diálise pode ser efetivamente usada como um processo de separação com base no tamanho molecular das partículas de interesse. A força motriz para separação de moléculas grandes (proteínas) de moléculas menores (pequenas proteínas, peptídeos, aminoácidos e íons) é a diferença de concentração entre 2 soluções em lados opostos da membrana. 

A classificação do tamanho dos poros seletivos da membrana é referida como peso molecular de corte (molecular weight cut off - MWCO). O MWCO é determinado como o tamanho de soluto que é retida em ao menos 90%. Entretanto, a permeabilidade um soluto é também dependente da forma molecular, grau de carga hidratação, iônica e de polaridade da molécula. Dessa maneira, recomenda-se selecionar um MWCO com metade do tamanho molecular da partícula de interesse, ou com o dobro do tamanho molecular da partícula a ser removida.

Aplicações

  • Dessalinização de soluções de proteína e remoção de sais
  • Troca de tampão de soluções de proteínas ou outras macromoléculas
  • Preparação de amostras para purificação por cromatografia de troca iônica
  • Concentração de proteínas
  • Separação de proteínas de alto peso molecular de moléculas de baixo peso molecular

 

 

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